乳双歧杆菌Probio-M8作为一株分离自健康妇女母乳中的益生菌,经多年研究,发现其可以改善高果糖引起的高尿酸;缓解哮喘;缓解便秘、焦虑;辅助治疗冠心病和帕金森等。与此同时,对于乳双歧杆菌Probio-M8在免疫方面的作用也开展了一系列研究。本研究通过对免疫抑制大鼠模型灌服乳双歧杆菌Probio-M8并分析各项结果,来探讨其对宿主特异性免疫和非特异性免疫应答的调控作用。
实验设计
实验详情
1.实验对象
选取雌雄均等的大鼠共50只(体重180±20克),随机分为五组(空白对照组,模型对照组,低剂量益生菌组,中剂量益生菌组和高剂量益生菌组),每组10只。
2.实验过程
首先所有大鼠需先饲喂6天乳双歧杆菌Probio-M8以进行适应。第7天后,除空白对照组,其余四组大鼠每日注射环磷酰胺(CTX) 40mg/kg并连续3天,建立免疫功能抑制模型。三个益生菌组大鼠则给予不同量的益生菌进行干预,低剂量组为1x108 CFU/天,中剂量组为1x109 CFU/天,高剂量组为1x1010 CFU/天。
3.检测方法
对各组大鼠全血淋巴细胞亚群百分比,T淋巴细胞转化增殖活性,血清IgA、IgG、IL-2、IL-6、IFN-γ和TNF-α水平进行检测。
实验结果
1.全血淋巴细胞亚群百分比
与空白对照组相比,模型对照组全血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞百分比明显下降(P<0 .05),说明经过环磷酰胺处理后模型对照组大鼠免疫功能得到了抑制。与模型对照组相比,高剂量益生菌组大鼠全血cd3+t淋巴细胞、cd4+t淋巴细胞和cd8+t淋巴细胞百分比明显升高(p<0.01),而对于中低剂量益生菌组大鼠全血cd3+t淋巴细胞、cd4+t淋巴细胞和cd8+t淋巴细胞百分比升高不显著。与模型对照组相比,高中剂量组大鼠全血b淋巴细胞百分比明显升高(p<0.05),而低剂量组变化不明显。与模型对照组相比,高剂量组大鼠全血nk细胞百分比明显升高(p<0.01),而中低剂量组变化不明显(表1)。
机体细胞免疫由T淋巴细胞介导,体液免疫由B淋巴细胞介导,而非特异性免疫则由NK细胞等介导。这表明乳双歧杆菌Probio-M8可以通过提高细胞免疫、体液免疫和固有免疫应答作用来增强机体免疫调节能力。
表1. 各组大鼠全血T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞百分比
2.T淋巴细胞转化增殖能力
T淋巴细胞转化增殖实验是基于淋巴细胞对有丝分裂原的反应性,淋巴细胞转化增殖能力的强弱,在一定程度上代表淋巴细胞对外来抗原刺激反应的强弱,淋巴细胞只有成熟转化才能发挥效应,可以反映免疫细胞功能。实验发现与空白对照组相比,模型对照组大鼠淋巴细胞转化增殖活性明显降低(P<0 .01)。与模型对照组相比,高中剂量组大鼠t淋巴细胞转化增殖活性均显著升高(p<0.01)(表2)。
这表明经过乳双歧杆菌Probio-M8处理后,受到免疫抑制的大鼠T淋巴细胞转化增殖能力得到了恢复。
3.免疫球蛋白&血清指标
与空白对照组相比,模型对照组大鼠中IgA和IgG水平显著下降(P<0 .01);与模型对照组相比,高中剂量组大鼠血清iga和igg水平均显著升高(p<0.01),而低剂量组免疫球蛋白含量变化不明显。
与空白对照组相比,模型对照组大鼠血清细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α和TNF-γ水平显著下降(P<0 .01);与模型对照组相比,高中剂量组大鼠血清细胞因子il-2、il-6、tnf-α和tnf-γ水平显著升高(p<0.01);而对于低剂量组则是血清细胞因子il-2和ifn-γ水平有所升高(p<0.05)(表3)。
模型对照组大鼠免疫球蛋白和细胞因子表达都受到了抑制,从而使B淋巴细胞及Th1细胞、Th2细胞产生的IgA、IgG、IL-2和IL-6等细胞因子减少,免疫应答减弱。通过乳双歧杆菌Probio-M8处理后,大鼠血清中IgA、IgG、IL-2、IL-6、IFN-γ和TNF-α水平升高,这表明乳双歧杆菌Probio-M8可以通过促进B淋巴细胞、T淋巴细胞分泌免疫球蛋白以及Th1细胞和Th2细胞因子从而提高免疫抑制模型大鼠的体液免疫和细胞免疫功能。
表3. 各组大鼠血清IgA、IgG、IL-2、IL-6、IFN-γ和TNF-α水平
实验结论
乳双歧杆菌Probio-M8可以提高免疫抑制模型大鼠的淋巴细胞百分比、T淋巴细胞转化增殖能力以及提高血清中IgA、IgG、IL-2、IL-6、IFN-γ和TNF-α含量,从而改善细胞免疫、体液免疫以及固有免疫的应答调控,同时对于免疫抑制下大鼠的免疫调节有一定促进作用。
文章已发表于:
吉林大学学报(医学版)2020, 46(3):582-588